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                熱門關鍵詞: 電子測量  生物微流控  等離子表面處理設備   薄膜分析設備  單細胞操縱分析    生物微流控

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                細胞》培養芯片-BE-GRADIENT

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                Datasheet-BG
                • 細☆胞培養芯片-BE-GRADIENT

                • BE-GRADIENT是一種在仿生條件▼下用於細胞培養的多功 能微流》控芯片。它允許在化學梯度下進行細胞培養。所使用聚合物材料的光學透目光炯炯明度使得使用相差、熒光和共聚焦顯微鏡來監測⌒ 實驗成為可能。 典型→應用實例有細胞/球體的侵襲和遷移、新陳代謝、血管 生成、趨化、局部缺血、細胞▅分化或氧化應激。
                • Datasheet-BG
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                功能圖解
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                細胞培養卐芯片-BE-GRADIENT

                概述

                BE-GRADIENT是一種在仿生條件下用於細胞√培養的多功 能微流控芯片。它允許在化學梯度下進行細胞培養。所使用聚合物材料的光學透明度使得使用相差、熒光和共聚焦顯微鏡來監測實風沙暴驗成為可能。 典型應用實例有↙細胞/球體的侵襲和遷移、新陳代謝、血管 生成、趨化、局部缺血、細胞分化或氧化應激。

                 

                材質

                BE-GRADIENT芯片發現了冷光和洪六由生物相容性材料制成,且氣體不滲 透,可ω 以有效地梯度控制CO2、O2等。具有良好的光學性能, 具有高透明度和低自熒光。

                技術特點

                產品經過消毒(每盒10片)。常溫(15-25℃)下,避免陽光直射,幹燥處 存放。

                細胞培養塗層

                BE-GRADIENT芯片經▲過處理,表面親水,便於用水溶液和/或凝膠填 充,以促進細胞◎粘附。

                如果需要特定包被塗層,根據廠家說明準備塗層溶液(Collagen I, Collagen IV, Fibronectin, Poly-L-Lysine, Poly-D-Lysine…)並應用到每個通道。 吸出塗層溶液,使用通道】體積5-10倍↓的蒸餾水或PBS洗滌,去除多余的塗層溶液。

                填充和處理

                1. 從指定的入口填充通道,確保流動方向與箭頭(A)指示的否則方向々 一致。

                 

                2. 為了更好的應用芯片,腔室內應◤保持完全幹燥(B)。

                3. 用P-100移液管取30 ~ 50μL溶液。建①議在中央通道中使用帶有 細胞的水凝膠溶液,將微型移液管你想要用你這道靈魂之力守護你的尖端插入中央通道▆入口。

                4. 慢慢按壓移液管活塞將溶液註入芯片(C, D)。首先,彎液面進 入腔體(E, F)。繼續註入,直到中心通道完全住被填滿█(G, H)。

                5. 在中央通道入口和出口☉滴入培養液,以避免過程中蒸發。 如果是3D細胞培養,建議每10-15秒翻轉芯片2-3分鐘,以獲得 均勻的細胞分布,防止細胞沈降在芯片底部。然後將芯◇片置於 37ºC培養箱中孵育30分鐘或待凝膠聚合完成ㄨ。 如果是2D細胞培養,在填充側通道之前,保證細胞附著在表面 (必要條件下)。所需時間因細胞類型而異。 一旦中央通道填充滿,按照以下〖步驟處理外側通道:

                6. 用P-100或P-1000移液管取200 μL的培養液加到同側的儲液池中。 培養液流過通道,到達【出口儲液池。註意把一側儲液池填滿, 並保持同一通道另一側的儲液池空你說沒什么好看著。在培養液體積相同的∩兩 個儲可是液池中,流量是相等的。可以用搖桿控制把培養液從一個 儲液池移到另一個儲液池。當每個↑儲液池的最終體積為100 μl 時,可以采用45°傾角。

                7. 如果將芯片連接到流體控制系統,那麽使¤用毛細管連接通道入 口和出口。入口和出口均連接到外徑2.4 mm的毛細管上。註意, 在使用流體控制系統之前,芯片和毛細管內須充滿培養液。 連接毛細管後,系統完全ζ封閉,可以從儲液池中取出培養液。

                註意:為防止♀過程中產生氣泡,請避免將移液管尖端完全倒空。當從吸液口移開 移液管時,緊緊握住◥柱塞,以免負壓將溶液吸走。 流體控制系統的配◥置 Beonchip對流體控制系統的♀配置提出了一些建議。 前處理: 1. 在培養箱↓中預熱毛細管和流體控制元件15-20分鐘。

                流體控制系⊙統的配置

                Beonchip對流體控制系統黑袍使者也是意氣風發的配置提出了一些建議。 前處理: 1. 在培養箱中預熱毛細管和流體控制元件15-20分鐘。

                2. 將系※統放置在超凈臺中。

                3. 在安裝流體控制系統之前,細胞須良好地粘附在∮表面。

                4. 芯片內部或入口/出口填充滿培養液。

                組裝ㄨ流體控制系統,需考慮以下事項:

                1. 將入口完全㊣填滿培養液,防止【有氣泡殘留。

                2. 在組裝系統之前,先將連接到入口的毛細管準備好。

                3. 入口和出口都連接外徑2.4 mm的接頭。當系統準備好,將接頭連 接在進口。過程中須非常」小心,以確保沒有氣泡進☆入系統。

                4. 將毛細管連接到出口,封閉系統。

                5. 檢查系統是否有○泄漏。在將系統放入生物反應櫃或培養箱之前, 讓泵運行幾分鐘。

                細胞接種

                為了在3D環境中培養,需要⊙制備含有細胞的水凝膠混合物。 下面的參考文獻詳細▆介紹了BE-GRADIENT芯片的接種協議: 1. chip: Generating pseudopalisades and enhancing aggressiveness through blood vessel obstruction events. Neuro Oncol 19 (4): 503-513. doi: 10.1093/neuonc/now230 2. Ayuso JM, Virumbrales-Muñoz M, Lacueva A, Lanuza PM, ChecaChavarria E, Botella P. et al. (2016) Development and characterization of a microfluidic model of the tumour microenvironment. Sci. Rep. 6, 36086; doi: 10.1038/srep36086 (2016) 3. Ayuso JM, Basheer HA, Monge R, Sánchez-Álvarez P, Doblaré M, Shnyder SD, et al. (2015) Study of the Chemotactic Response of Multicellular Spheroids in a Microfluidic Device. PLoS ONE 10(10): e0139515. doi:10.1371/journal.pone.0139515

                細胞顯微觀察的準備

                可監測固定的或〗活的細胞和化學梯度。傳統細胞培養中使用的大多數 監測系統都可以〗用於BEONCHIP微流控芯片。常用的固定物也〒可用。細胞活力可以¤用不同的染料來評估。此外,免疫熒光染色可識別特異性靶點。 細胞周期熒光記錄儀也可以使用。

                其他讀數

                可以復⌒ 蘇細胞,以便進行下遊應用,如□ 流式細胞,RNA提取(PCR)… 欲了解更多信息,請聯系BEC

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